VALIDASI METODE PENETAPAN KADAR METFORMIN DALAM PLASMA DARAH YANG DIBERIKAN BERSAMAAN DENGAN PEMBERIAN SARI BUAH PARE (Momordica charantia L.) SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (KCKT)

Abstract

Pada penelitian ini telah dilakukan validasi metode penetapan kadar metrofmin dalam plasma darah manusia yang diberikan bersamaan dengan  sari buah pare (Momordica charantia L.) secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Sari buah pare juga memiliki senyawa mebalit sekunder yang dapat mempengaruhi analisis metformin di dalam darah. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mendapatkan metode yang valid untuk penetapan kadar metformin terhadap pemberian sari buah pare dalam plasma manusia secara in vitro menggunakan KCKT dengan detektor UV menggunakan glibenklamid sebagai internal standard. Sistem KCKT menggunakan fase terbalik dengan kolom VP-ODS C-18, panjang kolom 5 µm, 4,6 x 150 mm.  Fase gerak yang di gunakan dengan komposisi  metanol:air (SDS 3 mM) pH 3 dengan phosporic acid (60:40) dengan kecepatan alir 1 mL/menit dan dideteksi pada panjang gelombang 226 nm. Berdasarkan hasil penelitian didapat nilai LOD sebesar 0,24 ppm dan nilai LOQ sebesar 0,8 ppm dari persamaan regresi y=0,0184x+0,0726 dengan koefisien korelasi (R²) 0,9979. Hasil uji akurasi tidak memenuhi persyaratan yaitu persen uji perolehan kembali tidak kurang dari 80% dan tidak lebih dari 120%, sedangkan hasil uji presisi telah memenuhi persyaratan dengan nilai persen koefisien variasi tidak lebih dari 20%.

In this study, validation of method for determining metrofmin levels in human blood plasma given together with bitter melon juice (Momordica charantia L.) has been performed using High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Bitter melon juice also has secondary metabolites which can affect the analysis of metformin in the blood. The aim of this research is to obtain a valid method for determining metformin levels when administering bitter melon juice in human plasma in vitro using HPLC with a UV detector using glibenclamide as an internal standard. The HPLC system uses reverse phase with a VP-ODS C-18 column, column length 5 µm, 4.6 x 150 mm.  The mobile phase used was a composition of methanol: water (SDS 3 mM) pH 3 with phosphoric acid (60:40) with a flow speed of 1 mL/minute and detected at a wavelength of 226 nm. The research results obtained an LOD value of 0.24 ppm and a LOQ value of 0.8 ppm from the regression equation y=0.0184x+0.0726 with a correlation coefficient (R2) of 0.9979. The results of the accuracy test do not meet the requirements, namely the percent recovery test is not less than 80% and not more than 120%, while the precision test results meet the requirements with a percent coefficient of variation value of not more than 20%.